Las infecciones del tracto urinario superior se define como la presencia y multiplicación de gérmenes en el tracto urinario o invasión de los tejidos adyacentes. En los pacientes de edad pediátrica,  la consecuencia más grave y frecuente son las cicatrices renales, que en un 20- 30% cuando son adultos desarrollan hipertensión, disfunción y fallo renal. Materiales y Métodos: se realizó un estudio descriptivo y retrospectivo de 8357 urocultivos procesados de pacientes ingresados en el Hospital Infantil José Luis Miranda de Santa Clara durante el año 2013, con el objetivo de caracterizar los aislamientos de los cultivos de orina de los pacientes hospitalizados con sospecha de ITU, así como determinar los niveles de resistencia antimicrobiana a los diferentes antibióticos probados por el método de difusión Bauer- Kirby. La muestra de estudio fueron los 464 con resultados positivos, el procedimiento técnico se realizó según la metodología establecida en el manual de organización y procedimientos. Resultados y Conclusiones: el grupo bacteriano aislado con mayor frecuencia fueron las enterobacterias con 429 aislamientos (92,5%) y las salas que mayor cantidad de aislamientos obtuvieron fueron: Nefrología, Pediatría general y Gastroenterología. Dentro de este grupo bacteriano predominaron la Escherichia coli y Klebsiella sp. En cuanto a los niveles de resistencia de la E. coli en las diferentes salas estudiadas se observó que el trimetropín/sulfametoxazol alcanzó altos niveles (54,6%), seguidos de la cefazolina (40,3%) y en la sala de Nefrología se obtuvo una resistencia a los aminoglucósidos preocupante por ser el antibiótico de elección en estos pacientes.